[干货]qPCR结果分析(附实例)
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发布时间:2024-10-23 20:36
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时间:6小时前
对于qPCR结果的统计分析,本文以药物对细胞培养液中p53 mRNA水平影响的检测为例,从实验设计到结果分析进行详细解答。
以检测药物对细胞培养液中p53 mRNA水平的影响为例。实验设计时,需准备两个3.5cm的小皿细胞,其中一皿加入药物,另一皿作为对照。处理一段时间后,收集细胞提取RNA并进行反转录,最后进行qPCR分析,内参选择GAPDH。实验中,p53和GAPDH均需设置三个PCR孔,作为PCR重复,用于消除实验操作误差。同时,需进行独立重复实验三次,统计结果。
实验完成后,得到Ct值结果。结果分析时,需计算2^-△△Ct。首先,取对照组的2^-△Ct进行平均(结果为0.000780573),然后将所有实验数据除以该平均值,对照组数据同样进行除法运算。整理数据后,可形成柱形图进行直观对比。
通过实验设计与结果分析的详细步骤,本文旨在提供一个全面的qPCR结果统计分析框架,帮助科研人员准确解读数据,实现实验目的。