脑立体定位注射|确认过眼神,这就是我要的技术文(初学者收藏)
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发布时间:2024-10-23 03:42
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热心网友
时间:2024-10-28 21:01
在神经科学研究领域,为了确保给药、毁损、病毒注射等处理手段或微电极、探针等信号采集能够准确到达目标脑区,脑立体定位技术是必不可少的。本文将详细介绍确定脑立体定位位点坐标的方法,以及实验过程中的注意事项。
在确定目标核团的坐标时,许多老师会参考文献上的坐标,但往往发现仅依靠文献坐标定位效果不理想。因此,我们建议首先参考脑定位图谱,了解目标核团的大小和形状,以便在进行病毒注射时有的放矢。具体方法如下:
1. 首先,找到一本合适的脑立体定位图谱。根据研究目的和小鼠种类不同,选择对应的Paxinos & Watson脑立体定位图谱。在选择了正确的图谱后,动物的体重应与图谱尽量一致,这些信息在图谱的introduction中都有详细介绍。
2. 查找目标核团的坐标。在图谱中找到目标核团的方法是:如果知道目标核团的英文全称,先在List of Structures中查找缩写,再按照缩写名在Index of Abbreviations中定位到目标核团所在的页码。脑立体定位图谱的两个重要平面是颅骨水平位,其原因是脑立体定位的中线旁开坐标以及深度坐标是根据颅骨水平位来确定的。
3. 确定目的核团坐标。在翻到该核团所在的页面,多是冠状切面,核团的长度要看所占的页数。根据这些数据估算核团的长度。核团的宽度、高度可直接由图上的坐标读出。水平线和纵坐标的交点就是核团的深度坐标,垂直线和横坐标的交点就是核团左右坐标,右下角的Bregma值就是核团的前后坐标。
4. 脑立体定位及病毒注射。实验注意事项包括找准脑立体定位点、进行荧光、有色染料预实验、注意小鼠的状态、大鼠颅骨水平位定位操作、熟能生巧等。小鼠固定及病毒注射实验包括将小鼠固定到立体定位仪上、调整定位仪门齿杆位置、检查固定成功、去除毛发、划开皮肤、去除颅骨表面结缔组织、暴露前后囟等。
5. 如果脑立体定位注射核团有难度,可以使用跨血脑屏障型AAV病毒,只需一针注射到小鼠的腹腔或尾静脉,即可解决脑立体定位注射的难题。
热心网友
时间:2024-10-28 21:03
在神经科学研究领域,为了确保给药、毁损、病毒注射等处理手段或微电极、探针等信号采集能够准确到达目标脑区,脑立体定位技术是必不可少的。本文将详细介绍确定脑立体定位位点坐标的方法,以及实验过程中的注意事项。
在确定目标核团的坐标时,许多老师会参考文献上的坐标,但往往发现仅依靠文献坐标定位效果不理想。因此,我们建议首先参考脑定位图谱,了解目标核团的大小和形状,以便在进行病毒注射时有的放矢。具体方法如下:
1. 首先,找到一本合适的脑立体定位图谱。根据研究目的和小鼠种类不同,选择对应的Paxinos & Watson脑立体定位图谱。在选择了正确的图谱后,动物的体重应与图谱尽量一致,这些信息在图谱的introduction中都有详细介绍。
2. 查找目标核团的坐标。在图谱中找到目标核团的方法是:如果知道目标核团的英文全称,先在List of Structures中查找缩写,再按照缩写名在Index of Abbreviations中定位到目标核团所在的页码。脑立体定位图谱的两个重要平面是颅骨水平位,其原因是脑立体定位的中线旁开坐标以及深度坐标是根据颅骨水平位来确定的。
3. 确定目的核团坐标。在翻到该核团所在的页面,多是冠状切面,核团的长度要看所占的页数。根据这些数据估算核团的长度。核团的宽度、高度可直接由图上的坐标读出。水平线和纵坐标的交点就是核团的深度坐标,垂直线和横坐标的交点就是核团左右坐标,右下角的Bregma值就是核团的前后坐标。
4. 脑立体定位及病毒注射。实验注意事项包括找准脑立体定位点、进行荧光、有色染料预实验、注意小鼠的状态、大鼠颅骨水平位定位操作、熟能生巧等。小鼠固定及病毒注射实验包括将小鼠固定到立体定位仪上、调整定位仪门齿杆位置、检查固定成功、去除毛发、划开皮肤、去除颅骨表面结缔组织、暴露前后囟等。
5. 如果脑立体定位注射核团有难度,可以使用跨血脑屏障型AAV病毒,只需一针注射到小鼠的腹腔或尾静脉,即可解决脑立体定位注射的难题。